Principio de funcionamiento del espectrofotómetro ultravioleta

La espectroscopia UV-Vis se considera una herramienta importante en química analítica. De hecho, es una de las técnicas más utilizadas en laboratorios clínicos y químicos. Esta herramienta se utiliza para el análisis cualitativo y la identificación de sustancias químicas. Sin embargo, su principal uso radica en la determinación cuantitativa de diferentes compuestos orgánicos e inorgánicos en solución.

La espectroscopia trata básicamente de la interacción entre la luz y la materia. Cuando la materia absorbe la luz, se produce un aumento en el contenido energético de los átomos o moléculas. La absorción del compuesto por luz visible o ultravioleta produce un espectro diferente.

Cuando se absorbe la radiación ultravioleta, esto provoca que los electrones se exciten desde el estado fundamental a un estado de mayor energía. La teoría que rodea este concepto establece que la energía de la radiación ultravioleta absorbida es en realidad igual a la diferencia de energía entre el estado de alta energía y el estado fundamental.

Espectrofotómetro ultravioleta-visible

Principio básico del espectro UV:

El principio de funcionamiento del espectrofotómetro UV se ajusta a la ley de Beer-Lambert. Esta ley establece que, siempre que un haz monocromático atraviesa una solución de una sustancia absorbente, la tasa de disminución de la intensidad de la radiación y el espesor de la solución absorbente son proporcionales a la concentración de la solución y a la radiación incidente.

La ley se expresa mediante la siguiente ecuación:

A = log (I0 / I) = ECI

A representa la absorbancia, I0 la intensidad de la luz en el recipiente de la muestra, L la intensidad de la luz que sale del recipiente de la muestra, C la concentración del soluto, L la longitud del recipiente de la muestra y E la tasa de absorción molar.

Según la ley de Beer-Lambert, se ha determinado que cuanto mayor sea el número de moléculas capaces de absorber luz a una longitud de onda determinada, mayor será la cantidad de luz absorbida.

Aplicación del espectro ULTRAVIOLETA:

El concepto y el principio del espectrofotómetro ultravioleta-visible tienen muchas aplicaciones. Por ejemplo, se utiliza para detectar grupos funcionales. También puede utilizarse para detectar la presencia o ausencia de cromóforos en compuestos complejos.

Esto también puede utilizarse para detectar conjugados en polienos. A medida que aumenta el doble enlace, la absorción se desplaza hacia longitudes de onda más largas. Además, el espectro UV puede utilizarse para identificar compuestos desconocidos. Los espectros del compuesto desconocido se comparan con los del compuesto de referencia. Si ambos espectros coinciden, el compuesto desconocido se identifica correctamente.

Los espectros UV también pueden ayudar a determinar la configuración de los isómeros geométricos. Se ha determinado que los alquenos cis se absorben a longitudes de onda diferentes a las de los alquenos trans. Si un isómero tiene una estructura no coplanar, aún puede determinarse mediante espectroscopia ULTRAVIOLETA.

Finalmente, la herramienta puede determinar la pureza de la sustancia. Para ello, se comparó la absortividad de la solución de muestra con la de una solución de referencia. La fuerza de absorción puede utilizarse para calcular la pureza de una sustancia.